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柱长影响三个重要参数。它们是柱效、保留(分析时间)和载气压力。
柱效(N) 与柱长呈正比。分离度是理论塔板数的平方根函数。比如,双倍的理论柱长(因此效率也会加倍)只能增加1.41 倍(实际上接近于1.2-1.3 倍)的分离度。如果峰分离度较小并需要高柱效(即窄峰)时,需使用较长的色谱柱。
在恒温条件下,溶质的保留与柱长呈正比。在程序升温条件下,溶质的保留是恒温条件下的1/3-1/2。通过增加柱长来提高柱效时,分析时间也会显著增加。
柱头压与柱长成正比。除非色谱柱的内径太小或太大,否则压力一般不是问题。直径较小,柱长较
长的色谱柱需要非常高的柱头压,而直径较大、柱长较短的色谱柱需要的柱头压较低。两种情况都
不很实际,并且可能成为分析的一种限制因素。载气的选择也会影响色谱柱压力。
色谱柱流失将随着柱长的增加而增加。较长的色谱柱的固定相较多,故会产生较多的降解产物。随
着柱长增加流失增加并不太大,必要时不会妨碍较长色谱柱的使用。
色谱柱成本与柱长直接相关。柱长加倍,色谱柱价格几乎也加倍。通过增加柱长来提高柱效,色谱
柱成本也会显著增加。考虑到分析时间的延长,增加柱长则应该是增加柱效的zui后考虑的一项合理
选择。
较短色谱柱的每米成本要高于较长色谱柱。将较长色谱柱切割成较短色谱柱似乎是一个省钱的好办
法,但我们不建议这样做。较小的切割段不能保证质量,可能与原来的完整色谱柱不同。理论上
讲,每个切割段都应当提供满意而一致的结果。实际上却经常不是这样。从原来的色谱柱切割下来
较短的切割段时,单个切割段变异的可能性更高。随着柱长、液膜厚度和固定相极性的增加,以及
柱内径的减小,将发现各个切割段之间的误差会越来越大。zui后,在其它柱架上重新缠绕较短的色
谱柱时,管线折断的几率也会增加。技术上来说,将色谱柱切割成较短的段将无法保障其性能。
色谱柱柱长选择概述
1. 如果不知道*长度,请先使用25-30 米长的色谱柱。
2. 10-15 米的色谱柱十分适用于分离含有很容易分离的溶质的样品或含溶质较少的样品。内径很小的色谱柱通常采用较短的长度以降低柱头压。
3. 如果通过其它方法(较小内径、不同的固定相、改变柱温)不能达到满意的分离度时,应使用50-60 米长的色谱柱。这种色谱柱适合分离含有很多组分的复杂样品。长的色谱柱的分析时间较长、费用较高。
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